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研究生： 林佳玲
論文名稱： 電泳晶片結合場放大樣品堆疊技術及改變分離通道對訊號放大效果之探討
指導教授： 陳俊顯
口試委員:
學位類別： 碩士
Master
系所名稱： 理學院 - 化學系
Department of Chemistry
論文出版年： 2006
畢業學年度： 94
語文別： 中文
論文頁數： 87
中文關鍵詞： 電泳晶片 、場放大樣品堆疊技術 、訊號放大
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    • 摘要
    本實驗利用三種通道設計，分別為十字、雙T型通道A (樣品槽距離分離通道6.0 mm)、雙T型通道B (樣品槽距離分離通道0.5 mm)，結合場放大樣品堆疊(field-amplified sample stacking)技術，探討濃縮放大的效果。場放大樣品堆疊技術 (field-amplified sample stacking, FASS)是將樣品溶於低導電度的溶液中，因樣品區段所感受到的電場強度較沖堤溶液區段大，而達到樣品濃縮堆疊的效果，在進行濃縮時，水的區段會影響偵測的訊號，所以要設法消除水訊號的干擾。為了降低電滲流，在緩衝溶液內添加界面活性劑(CTA+BF4-, n-hexadecyltrimethyl ammonium tetrafluoroborate)，使分析物和低導電度溶液的訊號分開。雙T型通道B的放大效果最佳，針對此通道，進行偵測表現的探討。為了改善再現性不佳的問題，採用清通道的步驟，在分離步驟之後，在廢液槽接地端，使得殘留的樣品可以被清除，可以得到訊號強度的相對標準偏差為3.9 ％(n = 8)。對於偵測神經傳導物質多巴胺(dopamine, DA) 偵測極限為50 nM。為了改善CTA+BF4-修飾時間過久的缺點，探討各種修飾劑的修飾效果，其中以1,3-diamino propane的修飾效果最佳。利用修飾3 mM 1,3-diamino propane分離兩種物質DA和IP (isoproterenol)，得到最佳化的解析度為1.14。由濃縮堆疊前後的實驗結果得知放大倍率為77倍。

    第一章 毛細管電泳及電泳晶片簡介 1 1-1毛細管電泳發展 1 1-2電泳基本原理 2 1-2-1電泳流(electrophoretic flow) 3 1-2-2電滲流(electroosmosis flow) 4 1-2-3粒子遷移速率 6 1-3毛細管電泳裝置介紹 7 1-4電泳晶片的簡介 8 1-5應用於電泳晶片的電化學偵測法 8 1-6電泳晶片結合電化學偵測法的文獻回顧 9 1-7樣品濃縮技術介紹 15 1-7-1場放大樣品堆疊技術(FASS) 15 1-7-2大體積樣品堆疊技術(LVSS) 17 1-7-3掃集式濃縮技術(sweeping) 19 1-8濃縮技術的相關文獻 20 第二章 實驗源起 23 2-1實驗動機 23 2-2前情摘要 23 2-2-1通道設計 23 2-2-2不同通道結合FASS技術 24 2-2-3放大機制理論說明 27 2-3實驗設計 31 第三章 實驗部分 33 3-1藥品與器材 33 3-1-1藥品 33 3-1-2器材 38 3-2電泳晶片製作 44 3-2-1PDMS通道製作 44 3-2-2-1矽晶片母模製作 44 3-2-2-2 PDMS的製作 45 3-2-2電極製作 47 3-2-3電泳晶片的黏合 49 3-3緩衝溶液配製 51 3-4實驗流程 52 3-4-1電泳晶片前處理 52 3-4-2儀器架設 52 3-4-3分析物進樣和分離模式 54 3-5實驗參數設定 55 3-5-1分析物選擇 55 3-5-2分析物電位判定 56 3-5-3工作電極電位選擇 57 第四章 結果與討論 59 4-1訊號再現性探討 59 4-2電極訊號靈敏度探討 60 4-3線性範圍探討 63 4-4偵測極限探討 66 4-5不同修飾劑的修飾效果比較 67 4-6修飾劑濃度 76 4-7分離效果探討 77 4-8放大倍率 82 第五章 結論 84 第六章 參考文獻 85

    (1) Kohlarush, F. Phys. Chem. 1897, 62, 209.
    (2) Tiselius, A. Trans. Farady Soc. 1937, 33, 524.
    (3) Konstantinov, R. B.; Bakulin, E. Russ. J. Phys. Chem. 1965, 3, 315.
    (4) Hjerten, S. Chromatogr. Rev. 1967, 9, 122.
    (5) Mikkers, F. E. P.; Everaerts, F. M.; Verheggen, T. P. E. M. J. Chromatogr. 1979, 169, 11.
    (6) Jorgenson, J. W.; Lukacs, K. D. Anal. Chem. 1981, 53, 1298-1302.
    (7) Terabe, S.; Otsuka, K.; Ichikawa, K.; Tsuchiya, A.; Ando, T. Anal. Chem. 1984, 56, 111-113.
    (8) Hjerten, S.; Zhu, M. D. J. Chromatogr. 1985, 346, 265-270.
    (9) Cohen, A. S.; Karger, B. L. J. Chromatogr. 1987, 397, 409-417.
    (10) Verheggen, T.; Schoots, A. C.; Everaerts, F. M. J. Chromatogr. 1990, 503, 245-255.
    (11) Tsuda, T. Anal. Chem. 1987, 59, 521-523.
    (12) Kennedy, R. T.; Jorgenson, J. W. Anal. Chem. 1989, 61, 1128-1135.
    (13) Yan, C.; Dadoo, R.; Zare, R. N.; Rakestraw, D. J.; Anex, D. S. Anal. Chem. 1996, 68, 2726-2730.
    (14) 劉耿仁 碩士論文, 國立清華大學, 新竹市2005.
    (15) Grubb, W. T.; King, L. H. Anal. Chem. 1980, 52, 270-273.
    (16) Woolley, A. T.; Lao, K. Q.; Glazer, A. N.; Mathies, R. A. Anal. Chem. 1998, 70, 684-688.
    (17) Wang, J.; Tian, B. M.; Sahlin, E. Anal. Chem. 1999, 71, 3901-3904.
    (18) Wang, J.; Tian, B. M.; Sahlin, E. Anal. Chem. 1999, 71, 5436-5440.
    (19) Wang, J.; Polsky, R.; Tian, B. M.; Chatrathi, M. P. Anal. Chem. 2000, 72, 5285-5289.
    (20) Martin, R. S.; Gawron, A. J.; Lunte, S. M.; Henry, C. S. Anal. Chem. 2000, 72, 3196-3202.
    (21) Chen, D.-c.; Hsu, F.-L.; Zhan, D.-Z.; Chen, C.-h. Anal. Chem. 2001, 73, 758-762.
    (22) Pumera, M.; Wang, J.; Grushka, E.; Polsky, R. Anal. Chem. 2001, 73, 5625-5628.
    (23) Martin, R. S.; Ratzlaff, K. L.; Huynh, B. H.; Lunte, S. M. Anal. Chem. 2002, 74, 1136-+.
    (24) Zeng, Y.; Chen, H.; Pang, D. W.; Wang, Z. L.; Cheng, J. K. Anal. Chem. 2002, 74, 2441-2445.
    (25) Lapos, J. A.; Manica, D. P.; Ewing, A. G. Anal. Chem. 2002, 74, 3348-3353.
    (26) Wang, J.; Chen, G.; Chatrathi, M. P.; Fujishima, A.; Tryk, D. A.; Shin, D. Anal. Chem. 2003, 75, 935-939.
    (27) Wu, C. C.; Wu, R. G.; Huang, J. G.; Lin, Y. C.; Chang, H. C. Anal. Chem. 2003, 75, 947-952.
    (28) Osbourn, D. M.; Lunte, C. E. Anal. Chem. 2003, 75, 2710-2714.
    (29) Hebert, N. E.; Kuhr, W. G.; Brazill, S. A. Anal. Chem. 2003, 75, 3301-3307.
    (30) Manica, D. P.; Mitsumori, Y.; Ewing, A. G. Anal. Chem. 2003, 75, 4572-4577.
    (31) Yan, J. L.; Du, Y.; Liu, J. F.; Cao, W. D.; Sun, S. H.; Zhou, W. H.; Yang, X. R.; Wang, E. K. Anal. Chem. 2003, 75, 5406-5412.
    (32) Wang, J.; Chen, G.; Chatrathi, M. P.; Musameh, M. Anal. Chem. 2004, 76, 298-302.
    (33) Liu, Y.; Vickers, J. A.; Henry, C. S. Anal. Chem. 2004, 76, 1513-1517.
    (34) Lacher, N. A.; Lunte, S. M.; Martin, R. S. Anal. Chem. 2004, 76, 2482-2491.
    (35) Ertl, P.; Emrich, C. A.; Singhal, P.; Mathies, R. A. Anal. Chem. 2004, 76, 3749-3755.
    (36) Xu, J. J.; Bao, N.; Xia, X. H.; Peng, Y.; Chen, H. Y. Anal. Chem. 2004, 76, 6902-6907.
    (37) Lai, C.-C. J.; Chen, C.-h.; Ko, F.-H. J. Chromatogr. A. 2004, 1023, 143-150.
    (38) Garcia, C. D.; Dressen, B. M.; Henderson, A.; Henry, C. S. Electrophoresis 2005, 26, 703-709.
    (39) Vickers, J. A.; Henry, C. S. Electrophoresis 2005, 26, 4641-4647.
    (40) Yong, K.; Hengwu, C.; Yurong, W.; A, S. S. Electrophoresis 2006, 27.
    (41) Burgi, D. S.; Chien, R. L. Anal. Chem. 1991, 63, 2042-2047.
    (42) Chien, R. L.; Burgi, D. S. Anal. Chem. 1992, 64, A489-A496.
    (43) Chien, R. L. Anal. Chem. 1991, 63, 2866-2869.
    (44) Chien, R. L.; Helmer, J. C. Anal. Chem. 1991, 63, 1354-1361.
    (45) Chien, R. L.; Burgi, D. S. Anal. Chem. 1992, 64, 1046-1050.
    (46) Burgi, D. S. Anal. Chem. 1993, 65, 3726-3729.
    (47) Zhao, Y. P.; Lunte, C. E. Anal. Chem. 1999, 71, 3985-3991.
    (48) Weiss, D. J.; Saunders, K.; Lunte, C. E. Electrophoresis 2001, 22, 59-65.
    (49) Quirino, J. P.; Terabe, S. Science 1998, 282, 465-468.
    (50) Quirino, J. P.; Terabe, S. Anal. Chem. 1999, 71, 1638-1644.
    (51) Jacobson, S. C.; Ramsey, J. M. Electrophoresis 1995, 16, 481-486.
    (52) Wen, J.; Cassidy, R. M. Anal. Chem. 1996, 68, 1047-1053.
    (53) Kutter, J. P.; Ramsey, R. S.; Jacobson, S. C.; Ramsey, J. M. Journal of Microcolumn Separations 1998, 10, 313-319.
    (54) Li, J. J.; Wang, C.; Kelly, J. F.; Harrison, D. J.; Thibault, P. Electrophoresis 2000, 21, 198-210.
    (55) Lichtenberg, J.; Verpoorte, E.; de Rooij, N. F. Electrophoresis 2001, 22, 258-271.
    (56) Yang, H.; Chien, R. L. J. Chromatogr. A. 2001, 924, 155-163.
    (57) Palmer, J.; Burgi, D. S.; Munro, N. J.; Landers, J. P. Anal. Chem. 2001, 73, 725-731.
    (58) Sera, Y.; Matsubara, N.; Otsuka, K.; Terabe, S. Electrophoresis 2001, 22, 3509-3513.
    (59) Lichtenberg, J.; de Rooij, N. F.; Verpoorte, E. Electrophoresis 2002, 23, 3769-3780.
    (60) Beard, N. R.; Zhang, C. X.; deMello, A. J. Electrophoresis 2003, 24, 732-739.
    (61) Gong, M. J.; Wehmeyer, K. R.; Limbach, P. A.; Arias, F.; Heineman, W. R. Anal. Chem. 2006, 78, 3730-3737.
    (62) 賴啟仲 碩士論文, 國立清華大學, 新竹市2003.
    (63) 卓振源 碩士論文, 國立中山大學, 高雄市1993.
    (64) Chaudhury, M. K.; Whitesides, G. M. Langmuir 1991, 7, 1013-1025.

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