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研究生: 潘泓廷
Pan Hung-Ting
論文名稱: 基因晶片系統點印與雜交條件及應用於MRC5CVI細胞輻射照射之研究
指導教授: 許志楧
Ian Hsu
口試委員:
學位類別: 碩士
Master
系所名稱: 原子科學院 - 生醫工程與環境科學系
Department of Biomedical Engineering and Environmental Sciences
論文出版年: 2002
畢業學年度: 90
語文別: 中文
論文頁數: 72頁
中文關鍵詞: 基因晶片cDNA微陣列
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  • cDNA微陣列系統為一套可用來觀察大量基因表現之工具,屬於基因晶片中的一支,其硬體包含了點印系統及掃瞄系統兩大部份。約可同時觀察6000~10000個基因,在研究細胞生理及臨床診斷上是一個相當有力的技術。
    本篇文章分成兩大部份,一部份是cDNA微陣列系統的探討,其中包含點印環境的探討、雜合條件的改變、不同的清洗方法及玻片點印完之後處理的改變,另一部份則是探討,經輻射照射後MRC5CVI細胞之基因表現。在系統的探討部份,我們想藉由雜合條件的改變,觀察是否能得到更好的雜合效率。並且藉由加入額外的清洗步驟、UV-crosslinking及不同的清洗方法,觀察在何種組合之下,我們可以得到最好的訊雜比值。而在輻射照射方面,本篇論文最主要之目的是,利用微陣列系統來分析MRC5CVI照射輻射前後的基因表現差異。此結果將用來當作,未來要比較正常和運動失調及微血管擴張症細胞,在相同物理劑量及相同存活劑量照射下,基因表現圖譜的差異之重要參考資料。


    目錄 中文摘要 I 英文摘要 II 誌謝 III 目錄 IV 圖表目錄 VII 第一章 緒論 前言 1-1 cDNA微陣列系統之發明及其應 1-2 研究目的 第二章 基因晶片原理及基本實驗流程簡介 2-1 基因晶片原理 2-2 基因晶片基本實驗流程簡介 2-2.1 玻片備製、點印過程及其後續處理 2-2.2 探針基因的備製 2-2.3 樣本的備製 2-2.4 雜合反應 2-2.5 掃瞄影像 2-2.6 數據分析 第三章 實驗目的及其流程 3-1 雜合條件的改變 3-1.1 實驗假設 3-1.2 實驗設計及其步驟 3-1.3 預其結果 3-2 不同的清洗方法及玻片點印完之後處理的改變 3-2.1 實驗假設 3-2.2 實驗設計及其步驟 3-2.3 預期結果 3-3 生物實驗的設計及流程 3-3.1 實驗假設及其流程 3-3.2 實驗步驟 (A) MRC5CVI及AT細胞的培養 (B) 實驗劑量的選取 (C) 總核醣核酸的萃取 (D) 標定螢光染劑 (E) 生物晶片的備製(MBPL-15k) 3-3.3 預期結果 第四章 實驗數據與分析 4-1 不同的清洗方法及玻片點印之後處理的改變 4-1.1 實驗結果 4-1.2 數據分析 4-2 雜合條件的改變 4-2.1 實驗結果 4-2.2 實驗討論 4-3 生物實驗 4-3.1 MRC5CVI細胞株的生長曲線 4-3.2 殘存曲線 4-3.3 總核醣核酸的萃取 4-3.4 以基因微陣列觀察MRC5CVI輻射照射後基因表現之變化 第五章 結論 5-1 不同的清洗方法及玻片點印之後處理的改變 5-2 雜合條件的改變 參考文獻 附 錄

    參考文獻
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